分光光度計,又稱(chēng)光譜儀(spectrometer),是將成分復雜的光,分解為光譜線(xiàn)的科學(xué)儀器,通過(guò)對這些光譜線(xiàn)進(jìn)行成分分析進(jìn)而確定測量樣品的成分。測量范圍一般包括波長(cháng)范圍為380~780 nm的可見(jiàn)光區和波長(cháng)范圍為200~380 nm的紫外光區。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。如鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長(cháng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續色譜;該色譜常用為可見(jiàn)光分光光度計的光源。
為了進(jìn)一步了解其原理,我們先對分光這一概念進(jìn)行闡述。
分光
所謂分光,*是利用色散現象可以將波長(cháng)范圍很寬的復合光分散開(kāi)來(lái),成為許多波長(cháng)范圍狹小的“單色光”,這種作用稱(chēng)為“分光”。像我們所知的,使用棱鏡可以將太陽(yáng)光分解為七色光,彩虹的形成*是*為人所熟知的分光現象。
分光不*于棱鏡分光(折射法)一種。但其他的分光現象一般需要較為復雜的方法實(shí)現,不太常見(jiàn)。具體的類(lèi)型如下:
1)利用棱鏡來(lái)分光(光的折射率依賴(lài)于波長(cháng));
2)利用衍射現象來(lái)分光;
3)利用法布里-珀羅標準具來(lái)分光;
4)利用邁克爾遜干涉+傅立葉變換的傅立葉分光:
5)利用光散射的分光。
分光光度計
簡(jiǎn)單而準確地講,分光光度計使用了兩個(gè)部分來(lái)實(shí)現其檢測的功能。*部分是分光,將所使用的特定光源所發(fā)出的復合光分解為“單色光”,這些光通過(guò)樣品,一部分光會(huì )被吸收或反射。第二部分是檢測裝置,對通過(guò)了樣品的光進(jìn)行分析,可以了解到某一波長(cháng)段的光會(huì )出現大幅減少或其他的變化。這些變化的原因正是樣品中含有某些特定的物質(zhì)造成的。
這樣我們便基本確定了儀器的組成:
按所述順序依次為光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器以及顯示與存儲系統。我們依次對這些組成部分進(jìn)行簡(jiǎn)單的解釋。
光源
鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的400~760nm波長(cháng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍靛,紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見(jiàn)光分光光度計的光源。
氫燈(或氘燈)的發(fā)射光譜:氫燈能發(fā)出185~400 nm波長(cháng)的光譜可作為紫外光光度計的光源。
單色器
即使用分光裝置將光源產(chǎn)生的光分解,產(chǎn)生特定波長(cháng)的光。
樣品室
簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),*是放置測試樣品的位置。一般來(lái)講,分光光度計的測試要求比較嚴格,需要的樣品規格都是固定的,不能隨意改變,否則測量值會(huì )失準。
檢測器和信號處理器以及顯示存儲系統
檢測透過(guò)樣品后的光的色度,即確定測試樣品對光譜的吸收值,轉化形成電信號,并進(jìn)行一定的轉換處理,使之能夠以示值的形式顯示在顯示屏上,并可進(jìn)行定量分析和數值存貯。