常見(jiàn)的PCR儀有四種類(lèi)型,分別是普通基礎PCR儀,梯度PCR儀,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀和原位PCR儀。這四種PCR儀的一般原理有相似的地方,但在結構和配件方面還存在一些差異。那么它們有哪些異同點(diǎn)呢?
PCR儀不同分類(lèi)的對比
(1)普通基礎PCR儀由主機,加熱模塊,PCR管樣品基座,熱蓋,控制軟件組成。
(2)梯度PCR儀除具有普通PCR儀的結構外,還具有特殊的梯度模塊,可實(shí)現對梯度溫度和梯度時(shí)間等參數的調整。因此可以在一次實(shí)驗中對不同樣品設置不同的退火溫度和退火時(shí)間,從而可在短時(shí)間內對PCR實(shí)驗條件進(jìn)行優(yōu)化,提高PCR科研效率。
(3)實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀在普通PCR儀的基礎上增加一個(gè)熒光信號采集系統和計算機分析處理系統。熒光檢測系統主要包括激發(fā)光源和檢測器。激發(fā)光源有鹵鎢燈光源、氬離子激光器、發(fā)光二極管LED光源,前者可配多色濾光鏡實(shí)現不同激發(fā)波長(cháng),而單色發(fā)光二極管LED價(jià)格低、能耗少、壽命長(cháng),不過(guò)因為是單色,需要不同的LED才能更好地實(shí)現不同激發(fā)波長(cháng)。監測系統有超低溫CCD成像系統和PMT光電倍增管,前者可以一次對多點(diǎn)成像,后者靈敏度高但一次只能掃描一個(gè)樣品,需要通過(guò)逐個(gè)掃描實(shí)現多樣品檢測,對于大量樣品來(lái)說(shuō)需要較長(cháng)的時(shí)間。
(4)原位PCR儀與普通PCR儀相比,用玻片代替了PCR管,其反應過(guò)程是在載玻片的平面上進(jìn)行的。